二十世纪60年代初期MacFarlane、Davie和Ratnoff等分别提出了凝血过程的“瀑布学说”认为血液中的凝血因子以无活性酶原形式存在，当某一凝血因子被激活后，可使许多凝血因子按一定的次序先后被激活，彼此之间有复杂的催化作用，又被称为“瀑布样学说”。认为凝血是一系列凝血因子相继被酶解激活的过程，凝血因子按一定顺序被激活，最终使纤维蛋白原转变为纤维蛋白的过程，分为内源性途径、外源性途径和共同凝血途径。

“凝血瀑布”图

凝血过程可分为三个阶段，一是凝血酶原激活物形成，二是凝血酶形成，三是纤维蛋白形成。刺破小血管造成机体出血时先是受损血管收缩，使伤口缩小、血流减慢、凝血物质聚集，局部血液粘稠度会增高，有利于止血。血管内皮下成分暴露致使血小板活化，发生黏附、聚集、释放反应，局部形成血小板血栓堵塞伤口。同时，暴露的内皮下组分激活Ⅻ因子启动内源性凝血途径，释放组织因子启动外源性凝血途径，最终形成纤维蛋白血栓，堵塞伤口，完成凝血。其中参与内源性凝血因子有Ⅷ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ、Ⅻ因子，参与外源性凝血的因子有Ⅲ、Ⅶ因子，参与共同途径的凝血因子有Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅹ因子，由这些因子共同完成血液的凝固过程。

血凝检测的主要方法有三种：凝固法、发色底物法和免疫比浊法。

目前，凝固法是最常使用的血凝检测方法，它是根据血浆凝固过程中特定属性的变化来测定凝血功能。根据观测属性的不同，凝固法又可分为光学法和磁珠法，如果应用光学原理检测浊度的变化则属于光学法，应用磁珠运动检测黏度的变化则属于磁珠法(一种机械法测量)。其中，光学法血凝检测更为常见，其仪器制造成本也更低。而磁珠法血凝检测主要面向高端市场，其检测样本量可以比光学法血凝检测的试剂用量更低，并且不受样品的光学异常、加样中的气泡等影响，大大节约试剂用量并提高检测结果的准确度

免疫比浊法是将被检物与其相应抗体混合形成复合物，从而产生足够大的沉淀颗粒，通过透射比浊或散射比浊进行测定。此法操作简便，准确性好，便于自动化。

其中发色底物法是通过测定产色底物的吸光度变化来推测所测物质的含量和活性的，该方法又可称为生物化学法。其原理是通过人工合成与天然凝血因子有相似的一段氨基酸排列顺序、并含有特定作用位点的发色小肽，并将可水解产色的化学基因与作用位点的氨基酸相连。测定时由于凝血因子具有蛋白水解酶的活性，它不仅能作用于天然蛋白质肽链，也能作用于人工合成的肽链底物，从而释放出产色基因，使溶液呈色。产生颜色的深浅与凝血因子活性成比例关系，故可进行精确的定量。

它以酶学方法为基础，便于自动化和标准化，主要检测蛋白酶类的指标，如抗凝血酶，组织型纤溶酶原激活物，纤溶酶原激活剂抑制物（PAI)及肝素等。

发色底物为化学合成的小肽，其一端为发色基团（pNA）。特定的酶（如凝血酶）可将pNA催化解离下来，游离pNA可通过分光光度计或酶标仪检测，从而确定相应物质的活性。

常见的发色底物有：凝血酶发色底物S-2238，FXa发色底物S-2765等。

发色底物法是目前主要的肝素效价检测方法，是欧洲药典和美国药典中规定的肝素（特别是低分子肝素）检测方法。该方法也广泛用于实验室研究和体外诊断。优点主要表现在：用酶学方法直接定量、测定结果准确、重复性好、便于自动化和标准化、所需样品量小。

凝血仪使用产色物质在检测血栓／止血指标时大致可分成三种模式。
①对酶的检测：即在含酶的样品中直接加入产色物质，因为酶可裂解产色物质释放PNA，监测由于PNA释放而导致被检样品在405nm处光吸收的变化，就可推算样品中酶的活性。如对凝血酶、纤溶酶等的检测。
②对酶原的检测： 要对某种酶原进行测定，必须先用激活剂将其激活，使其活化位点暴露，才可将产色物质上的PNA裂解下来。加入的激活剂必须过量，因为只有这样才能使酶原被全部激活，酶原的量才会同样品中酶的活性成一定的数量关系。样品中酶的活性可通过PNA释放，即样品吸光度的变化反应出来，由此则可推算出样品中酶原的含量。
③对酶抑制物的检测： 首先往待检样品中加入过量对应的酶中和该抑制物，剩余的酶可裂解产色物质释放PNA，监测由于PNA释放而导致光吸收的变化，就可测出酶的活性，进而可推算出样品中抑制物的含量。如对抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）等。

雅为凝血原料